Амплификаторы (термоциклер)
Для осуществления полимеразной цепной реакции лаборатории требуется амплификатор, «копирующий» образец ДНК.
Принцип работы амплификаторов
Полимеразная цепная реакция стала ключевым инструментом в биологических исследованиях для анализа ДНК или РНК нуклеиновых кислот. Устройства применяются в различных областях: анализ экспрессии генов, белковых комплексов, генотипирование SNP, исследование генной копии, обнаружение патогенов на основе тепловой денатурации, профилирование микроРНК и т.д. Полимеразная цепная реакция обнаруживает двукратную разницу в числе копий ДНК.
Амплификатор для исследований во многом работает по принципу термостатов. Оборудование для полимеразной цепной реакции пцр нагревает, охлаждает фрагмент ДНК для его «копирования». Для ПЦР важно поддерживать определенную температуру, обеспечить цикличную последовательность.
Циклы амплификации ДНК включают несколько этапов:
- Денатурация. Водородные связи между двухцепочечными молекулами ДНК образца разрушаются, они становятся одноцепочечными. Для денатурации прибор нагревается до 94-98 градусов;
- Подсоединение праймеров. Праймеры – это короткие участки ДНК, подготовленные для проведения реакции, дополняют обрабатываемые цепочки, стимулируя синтез. Процесс идет со снижением градусов внутри прибора до 40-75; Элонгация. На последнем этапе происходит синтез новой ДНК-цепочки в диапазоне от 60 до 75.
Преимущества термоциклеров
- В устройствах амплификатора сразу отслеживается прогресс реакции, точное измерение ампликона на каждом цикле реакции, с высокой точностью при измерении исходного материала в образце.
- Расширенный динамический диапазон обнаружения, выполнение амплификации и детекции в одной пробирке, исключает необходимость визуализации результатов гель-электрофорезом, снижая риск контаминации продуктами ПЦР.
- Мультиплексная полимеразная реакция с DNA-оборудованием, позволяет одновременно амплифицировать и детектировать две или более последовательности ДНК в одной реакции, используя пробирки с разными флуорофорами.
Из чего состоят термоциклеры пцр
Модели с детекцией состоят из термоблока, системы термостатирования, а также блока управления. В термоблок оборудования устанавливают пробирки с биологическими образцами. Термоблоки бывают нескольких видов: твердотельные модели либо роторные. Термостатирующая система включает элементы Пельтье – термоэлектрические преобразователи, а также вентилятор, радиатор. Термостатирующая система включает элементы Пельтье – термоэлектрические преобразователи, а также вентилятор, радиатор.
Он обеспечивает быстрое изменение температуры, а также стабильно поддерживают ее. Термоболок и радиатор обычно объединены в единую конструкцию, а вентилятор располагается отдельно от них. Блок управления является микрокомпьютером, позволяя оператору управлять температурой, настраивать автоматическую амплификацию ДНК в соответствии с программой.
Термоциклеры оснащается жидкокристаллическим экраном, клавиатурой для ввода данных, имея простой пользовательский интерфейс. Некоторые модели амплификаторов требуют подключения к лабораторному ПК.
Выбор термоциклеров для ПЦР
В каталоге Биохид есть термоциклеры для проведения ПЦР с разными характеристиками:
- Скорость изменения. Нагрев, охлаждение зависят от материалов, из которых сделан термоблок, а также работы элементов Пельтье;
- Температурный градиент. Эта функция быстро и тонко настраивает параметры, ускоряя работу персонала;
- Несколько термоблоков. Проведение исследований одновременно на разных этапах для лабораторий с интенсивным потоком образцов.
- Цена по запросу.